谷胱甘肽是由谷氨酸（Glu）、半胱氨酸（Cys）和甘氨酸（Gly）组成的天然三肽，是一种含巯基（—SH）的化合物，广泛存在于动物安排、植物安排、微生物和酵母中。谷胱甘肽能和 5,5’-二硫代-双-（2-硝基苯甲酸）（5,5’- dithiobis-2-nitrobenoic acid，DTNB）反响发生 2-硝基-5-巯基苯甲酸和谷胱甘肽二硫化物（GSSG）。2-硝基-5-巯基苯甲酸为黄色产品，在波长 412nm 处具有最大光吸收。
1、规范品：称 1mg 规范品用 1mL 蒸馏水溶解，浓度为 1mg/mL。
分析天平、匀浆器/研钵、低温离心机、水浴锅、移液器、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿。
新鲜安排首先用 PBS 冲刷 2 次，然后称取动物安排或许植物安排 0.1g。参加用试剂一润洗过的匀浆器中（匀浆器提早放冰上预冷）；然后参加 1mL 试剂一（安排/试剂一份额坚持不变即可），敏捷冰上充沛研磨（运用液氮研磨作用更好）；8000g，4℃离心 10min；取上清液放置于 4℃待测，若暂时不能完结测验可放于-80℃保存（可保存 10 天）。
血浆：将搜集的抗凝血于 4℃，600g 离心 10 分钟，汲取上层血浆到另一支试管中，参加等体积的试剂一,
4℃，8000g 离心 10 分钟,将上清移入新的试管中放置于 4℃待测，若暂时不能完结测验可放于-80℃保存（可保存 10
血细胞：将搜集的抗凝血于 4℃，600g 离心 10 分钟，弃去上层血浆用 3 倍体积的 PBS 清洗 3 次（用 PBS 重悬血细胞，600g 离心 10 分钟），参加等体积试剂一，混匀后 4℃放置 10 分钟，8000g 离心 10 分钟，汲取上清放于 4℃待测，若暂时不能完结测验可放于-80℃保存（可保存 10 天）。
搜集不少于 500 万个细胞，首先用 PBS 清洗细胞 2 次（PBS 重悬细胞，600g 离心 10 分钟），参加 1mL 试剂一重悬细胞，重复冻融 2-3 次（可在液氮中冻住，37℃水浴中溶解）或进行超声（200W，超 3s，停 10s，重复 30 次），8000g 离心 10 分钟，搜集上清于 4℃待测，若暂时不能完结测验可放于-80℃保存（可保存 10 天）。
1、分光光度计预热 30min 以上，调理波长至 412nm，蒸馏水调零。
2、试剂二放置 37℃（哺乳动物）或 25℃（一般物种）水浴中保温 30min。
3、空白管检测：取 1mL 玻璃比色皿，顺次参加 100μL 蒸馏水，700μL 试剂二，200μL 试剂三，混匀，放置 2min
吸光度，吸光度减去空白孔（A1）为横坐标，依据吸光度（x）和浓度（y，μg/mL）做出规范曲线mL 玻璃比色皿，顺次参加 100μL 样本，700μL 试剂二，200μL 试剂三，混匀后静置 2min 检测 412nm 处吸光度 A2，ΔA= A2- A1。
V 样总：上清液总体积，1mL；V 样：参加反响系统中上清液体积，100μL=0.1mL；W：样本质量，g；Cpr： 上清液蛋白质浓度，mg/mL；细胞数量：以 106 为单位计量；2：血浆（血细胞）体积被稀释一倍。
4、 由于试剂一中含有蛋白质沉淀剂，因而上清液不能用于蛋白浓度测定。如需测定蛋白含量，需另取安排。
5、 假如测定吸光值超越线性规模吸光值，能添加样本量或许稀释样本后再进行测定。
