液氮冷冻保存法是细胞冻存常用的技能。主要是选用加保护剂,缓慢冷冻法冻存细胞。若细胞不加保护剂直接冷冻,细胞表里的水分会快速构成冰晶,对细胞构成损害。如细胞脱水使部分电解质浓度增高,pH值改动,部分蛋白质变性,引起细胞内部空间结构紊乱,溶酶体膜由此遭到损害而释放出溶酶体酶,使细胞内结构成分构成损坏,线粒体肿胀,功用丢掉,并构成能量代谢妨碍。胞膜上的类脂蛋白复合体也易损坏引起细胞膜通透性的改动,使细胞内容物丢掉。假如细胞内冰晶构成较多,随冷冻温度的下降,冰晶体积胀大构成细胞核DNA空间构型产生不可逆的损害,而致细胞逝世。
因而,液氮冷冻细胞技能的关键是尽可能地削减细胞内水分,削减细胞内冰晶的构成。慢速冷冻办法又可使细胞内的水分渗出细胞外,削减胞内构成冰结晶的时机,由此削减冰晶对细胞的损害。
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